Analisador cobas c 513
Princípios analíticos básicos – Versão 2.1
Software Versão 02-03
Roche Diagnostics
Analisador cobas c 513 · Software Versão 02-03 · Princípios analíticos básicos · Versão 2.1
2
Informações sobre a Publicação
Notas sobre a edição Esta publicação foi prevista para os operadores do
cobas c 513 analyzer.
Foram feitos todos os esforços para garantir que todas as
informações estejam corretas no momento da
publicação. No entanto, a Roche Diagnostics reserva-se o
direito a alterar essa publicação conforme necessário e
sem aviso no âmbito do desenvolvimento contínuo do
produto.
Capturas de tela As capturas de tela que aparecem nesta publicação
foram adicionadas exclusivamente para fins ilustrativos.
Os dados configuráveis e variáveis como os testes,
resultados ou nomes das vias visíveis nos mesmos não
serão usados para fins laboratoriais.
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direitos reservados.
Marcas registradas As seguintes marcas registradas são reconhecidas:
COBAS e COBAS C são marcas registradas da Roche.
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Versão da
publicação
Versão do software Data da revisão Descrição da mudança
Versão 1.0 01-01 Setembro de 2015 Versão 2.0
Versão 2.0 02-01 Março de 2016 Nenhuma alteração de conteúdo
Versão 2.1 02-03 Setembro de 2017 Nenhuma alteração de conteúdo
y Histórico da revisão
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3
Endereços de contato
Na União Europeia e
estados membros da EFTA
Fora da União Europeia e dos
estados membros da EFTA
Representante
autorizado
Roche Diagnostics GmbH
Sandhofer Strasse 116
68305 Mannheim
Alemanha
Fabricado para: Roche Diagnostics GmbH
Sandhofer Strasse 116
68305 Mannheim
Alemanha
Roche Diagnostics
Analisador cobas c 513 · Software Versão 02-03 · Princípios analíticos básicos · Versão 2.1
4
Índice
Prefácio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Uso previsto. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Símbolos e abreviações . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Sobre a tecnologia fotométrica . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
Sobre os princípios do teste . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
Sobre como os ensaios são exibidos no software 9
Dados no software usado para cálculos . . . . . . . . 10
Sobre ensaios de ponto final . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
Sobre os ensaios de 1 ponto. . . . . . . . . . . . . . . 12
Sobre os ensaios de 2 pontos finais . . . . . . . . 14
Sobre a calibração . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
Sobre tipos de calibração . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
Aspectos gerais dos tipos de calibração. . . . . 17
Sobre a calibração linear. . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Sobre a calibração RCM4 . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
Sobre o fator K . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
Sobre os métodos de calibração . . . . . . . . . . . . . . 23
Sobre a pesagem . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Aspectos gerais das verificações de calibração. . 25
Roche Diagnostics
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Prefácio 5
Prefácio
Os princípios analíticos básicos descrevem os algoritmos
principais do cobas c 513 analyzer software. A descrição
dos algoritmos principais abrange a calibração conforme
necessário para o cálculo de resultados para aplicações
de HbA1c.
Nesta secção
Uso previsto (5)
Símbolos e abreviações (5)
Uso previsto
O cobas c 513 analyzer é um analisador de química
clínica autônomo e totalmente automatizado previsto
para a determinação in-vitro de analitos em fluidos
corporais.
Símbolos e abreviações
Nomes de produtos Exceto quando o contexto indicar claramente o contrário,
são usados os seguintes descritores para os nomes de
produtos.
Símbolos
Nomes do produto Abreviação
cobas c 513 analyzer system sistema
cobas c 513 analyzer analisador
cobas c 513 analyzer software software
y Nomes de produtos
Símbolo Descrição
o Item da lista
u
Tópicos relacionados contendo informações
adicionais
q
Sugestão. Informação adicional sobre o uso
correto ou sugestões úteis.
w
Figura. Usado em títulos de figuras e em
referências cruzadas para as figuras.
y
Tabela. Usado em títulos de tabelas e em
referências cruzadas para as tabelas.
z
Equação. Usado em referências cruzadas para
equações.
y Símbolos usados na publicação
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6 Prefácio
Abreviações As seguintes abreviações são utilizadas:
Abreviação Definição
CE Comunidade Europeia
CQ Controle de qualidade
DP Desvio padrão
EFTA Associação Europeia de Comércio Livre
RCM4 Modo de cálculo de reação 4
STAT Tempo de resposta curto
y Abreviações
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7
Sobre a tecnologia fotométrica
A tecnologia fotométrica usa uma lâmpada do fotômetro
para irradiar luz mediante a amostra. Um detector mede a
absorvância da luz. A partir dessa absorvância, o sistema
calcula a concentração da amostra. A trajetória da luz do
fotômetro passa diferentes lentes, fendas e a agulha de
amostra antes de incidir em um detector.
Quando o feixe de luz entra na unidade do fotômetro, ele
atinge uma grade de difração. Ela separa a luz em seus
comprimentos de onda constituintes e reflete-os para
uma gama fixa de 12 fotodíodos. Cada fotodíodo está
posicionado de forma permanente para detectar luz com
um comprimento de onda diferente.
As leituras de absorvância são tomadas sempre que uma
célula de reação roda, passando pelo fotômetro. Quando
a célula de reação passa pela trajetória da luz do
fotômetro, a absorvância nos 12 comprimentos de onda é
medida para cada ensaio individual.
A Lâmpada do fotômetro F Banho de incubação K Unidade do fotômetro
B Filtro de corte infravermelho G Célula de reação e dispersão L Grade de difração
C Máscara H Fenda (OUT) M Detector
D Lente condensadora I Lente de imagiologia
E Fenda (IN) J Fenda
A B C D
E
F
G
H I J K L
M
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8 Sobre a tecnologia fotométrica
A maioria dos testes fotométricos da Roche Diagnostics
usa leituras de 2 comprimentos de onda para calcular os
resultados. O produto final de uma reação química
absorve a maior parte da luz a 1 comprimento de onda
específico. Mas, por vezes, existem interferências quando
se usa um único comprimento de onda (sistema
monocromático). Por isso, usar a diferença entre as
leituras em 2 comprimentos de onda (sistema
bicromático) elimina o efeito das interferências. As
leituras em 2 comprimentos de onda também
compensam a maior parte do ruído fotométrico, o que
melhora as resoluções fotométricas.
Um dos comprimentos de onda bicromáticos está em ou
perto de absorvância máxima do cromogênio produzido
pela reação. Um segundo comprimento de onda é
selecionado, onde ocorre pouca ou nenhuma
absorvância do cromogênio desejado.
Qualquer absorvância ( ) que ocorra devido à
interferência de outras substâncias na amostra é medida
no comprimento de onda secundário. Essa quantidade é,
depois, subtraída da absorvância total ( ) que ocorre
no comprimento de onda primário para obter a
absorvância líquida ( ).
Os pontos de medição ideais para cada teste fazem parte
dos parâmetros de aplicação que estão disponíveis
mediante download.
Os parâmetros de aplicação determinam como os
resultados finais são calculados para cada teste.
Comprimento de onda
Interseção
Absorvância
Observado
Cromóforo
A
2
A
1
A
C
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9
Sobre os princípios do teste
Os princípios dos testes fotométricos usam medições de
absorvância para o cálculo de resultados.
Nesta secção
Sobre como os ensaios são exibidos no software (9)
Dados no software usado para cálculos (10)
Sobre ensaios de ponto final (11)
Sobre como os ensaios são exibidos no software
A opção Análise em Utilitário > Aplicação exibe o tipo
de ensaio e os pontos de medição dentre outros
parâmetros de aplicação de um teste selecionado.
Tipos de ensaio e pontos de medição
Na lista no lado esquerdo de Utilitário > Aplicação
> Análise, você pode selecionar o teste que você
pretende visualizar.
Existem 7 campos de Ensaio/Tempo/Ponto:
• A primeira entrada exibe o tipo de ensaio selecionado.
• A segunda entrada exibe o tempo de reação em
minutos, que é o tempo após o qual o resultado é
reportado (hora do relatório).
• A terceira de seis entradas exibe os pontos de
medição selecionados.
• A sétima entrada exibe o método de cálculo.
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10 Sobre os princípios do teste
Medições usadas para cálculo Independentemente dos parâmetros de aplicação
programados, o sistema mede a absorvância de uma
mistura de reação em intervalos fixos de 18 segundos. No
entanto, nem todas as medições são usadas para calcular
o resultado. Por isso, a numeração dos pontos de
medição do fotômetro difere da numeração dos pontos
de medição usada nos cálculos.
A janela Monitor de reações na Calibração
> Resultado exibe que pontos de medição são usados
para o cálculo. O exemplo de uma janela Monitor de
reações exibe um ensaio de ponto final programado
para 2 pontos de medição ( e ). Os parâmetros
de aplicação definem o 17.º ponto de medição do
fotômetro para ser be e o 34.º ponto de medição do
fotômetro para ser .
Os valores na janela Monitor de reações são de
absorvância × 10
4
. Além disso, esses valores já estão
corrigidos para o valor do branco das cubetas, que é
determinado durante a medição de branco das cubetas.
u Tópicos relacionados
• Sobre os ensaios de 1 ponto (12)
• Sobre os ensaios de 2 pontos finais (14)
Dados no software usado para cálculos
Os dados usados para o cálculo dos tipos de ensaio são
exibidos em locais diferentes do software.
O relatório de medição do branco das cubetas contém
dados necessários para o cálculo dos valores de
absorvância, que são a base para todos os outros
cálculos.
A janela Info. de funcionamento em Calibração
> Resultado exibe as informações de calibração para
testes e calibradores individuais.
u Relatório de medição de branco das cubetas (11)
Janela Info. de funcionamento (11)
mp
1
mp
2
mp
1
mp
2
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11
Relatório de medição de branco das cubetas
O relatório de medição do branco das cubetas é
solicitado como parte da manutenção semanal e mede os
valores do branco das cubetas atuais. Os valores do
branco das cubetas atuais são comparados aos valores
do branco das cubetas em tempo real que são medidos
antes de cada medição. Os valores do branco das
cubetas em tempo real são exibidos no relatório do
monitor de reações.
Revision: sh/EF, 2015-09-07: Deleted C1 from
calculation of cell blank value. Review 27.08.2015
O valor do branco das cubetas em tempo real é definido
como valor médio das medições do branco das cubetas 2
e 3, executadas antes de cada medição de amostra:
.
Se a diferença entre os valores do branco das cubetas em
tempo real e o valor do branco das cubetas atual for
superior a 0,1 unidades de absorvância (Abs), é emitido
um alarme.
u Medições usadas para cálculo (10)
Janela Info. de funcionamento
A janela Info. de funcionamento exibe a curva de
calibração atual e valores para a aplicação selecionados
em Calibração > Resultado.
Para os ensaios de ponto final baseados em uma
calibração linear ou RCM4, o valor em Abs. S1 é igual ao
valor de absorvância do calibrador 1 × 10
4
(). Abs. S1
é subtraída da absorvância de reação de todas as
amostras incluindo calibradores 2 a 6, CQ, STAT e
amostras de rotina.
O fator K, bem com Abs. S1, é usado no cálculo de
resultados de cada teste medido.
Sobre ensaios de ponto final
O tipo fundamental do princípio de teste fotométrico
usado no sistema é o ensaio de ponto final.
As medições são tomadas pelo fotômetro em pontos de
medição específicos. Se as medições forem tomadas
depois de as reações estarem concluídas, a intensidade
do produto colorido (ou turbidimétrico) é um indicador da
concentração do componente de amostra. Essas
medições são chamadas de ensaios de ponto final.
Cell Blank Measurements Operator ID: admin 03/02/2015 14:35
Wavelength
17/10/2014
12:22
Cell No. Cell Blank
340
376 415 450 480 505 546 570
600
660
700
800
1
8718 7925 7940 7992 7916 7920 7964 7881 7938 7929 7957
7886
2
8709
7901
7919
7975 7900 7905
7951
7869
7925
7916
7943
7877
3
8718 7912 7928 7978 7902 7907 7955 7872 7929 7917 7941
7869
4
8716
7904
7920
7976 7903 7910
7958
7875
7933
7922
7947
7875
5
8718 7910 7925 7980 7905 7910 7956 7873 7930 7921 7948
7878
6
8727
7923
7932
7986 7910 7913
7958
7875
7929
7922
7949
7881
7
8723
7911
7928
7981
7906
7910
7955
7873
7929
7920
7949
7882
Cell No.
1
-
221
Abnormal Cell List
C2 C3+()2⁄
A
b
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12 Sobre os princípios do teste
Tipos de ensaio Existem 2 tipos de ensaio diferentes para ensaios de
ponto final:
Dados para cálculo Os valores correspondentes às variáveis usadas no
cálculo dos 2 tipos de ensaio de ponto final são exibidos
na janela Info. de funcionamento em Calibração
> Resultado.
u Dados no software usado para cálculos (10)
Nesta secção
Sobre os ensaios de 1 ponto (12)
Sobre os ensaios de 2 pontos finais (14)
Sobre os ensaios de 1 ponto
Um ensaio de 1 ponto é um ensaio de ponto final sem
medição de amostra em branco. Ele pode ser
programado para um ou mais reagentes. 1 ponto significa
que existe uma leitura em 1 ponto de medição.
Outras características de ensaio são as seguintes:
• O ponto de medição encontra-se entre 1 e 34:
• A leitura de absorvância pode ser tomada durante
qualquer rotação do disco após a adição do reagente
final.
• Os tempos de reação para a aplicação selecionada
estão dentro do intervalo de 3 a 10 minutos.
• O volume de reação encontra-se entre 75 μL e 185 μL.
Cálculo de ensaio de 1 ponto
Revision: sh/SA, 2015-09-07: Deleted R2 in whole
document. c513 has only two pipetting times R1 and R3.
Revision 28.08.2015
Um ensaio de 1 ponto pode ter reagentes dispensados
tanto no tempo de como no tempo de e . Os
gráficos podem mostrar um aumento ou diminuição da
absorvância quando ocorre a reação.
Tipo de ensaio fundamental Tipo de ensaio Característica
Ensaios de ponto final 1 ponto Ensaio de ponto final programado para um único ponto de
medição
2 pontos finais Ensaio de ponto final com amostra em branco
y Tipos de ensaio
1 mp
1
34≤≤
R1
R1
R3
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13
w Gráfico de ensaio de 1 ponto com esquerda: tempo de R1 e direita: tempo de R1 e R3
O cálculo da concentração do analito na amostra usa a
seguinte equação:
z
1
Hora
Absorvância
Hora
Absorvância
, , Valores do branco das cubetas da célula de
reação
(a)
(a) Veja Relatório de medição de branco das cubetas (11).
Pipetagem de amostra
Pipetagem de reagente nos tempos
Pipetagem de reagente nos tempos
Ponto de medição 1, ponto final (depois de a
reação ter atingido o equilíbrio)
Absorvância do ponto de medição 1
Valores de absorvância para cálculo da
concentração
(a)
(a) Veja a lista do monitor de reações
Concentração do analito na amostra
Fator de calibração
(b)
(b) Veja a janela Info. de funcionamento
Absorvância do calibrador 1 (Abs. S1)
(2)
Valor de concentração para calibrador 1
, Constantes do sistema para um declive de 1 e
uma interceptação de 0
C1
C2
C3
S
R1
R1
R3
R3
mp
1
Amp
1
C
x
KA
x
A
b
–()C
b
+[]IF
A
⋅ IF
B
+=
A
x
C
x
K
A
b
C
b
IF
A
IF
B
Roche Diagnostics
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14 Sobre os princípios do teste
Sobre os ensaios de 2 pontos finais
Um ensaio de 2 ponto é um ensaio de ponto final com
medição de amostra em branco. Ele pode ser
programado para dois ou mais reagentes. 2 pontos
significa que existem leituras em 2 pontos de medição. O
primeiro ponto de medição é a leitura de amostra em
branco, o segundo ponto de medição é a leitura da
absorvância final (ponto final).
Outras características de ensaio são as seguintes:
• Os pontos de medição encontram-se entre 1 e 34:
• A primeira leitura de absorvância pode ser tomada
durante qualquer rotação de disco. Normalmente é
tomada antes ou imediatamente após o reagente final
ter sido adicionado.
• A segunda leitura de absorvância pode ser tomada
durante qualquer rotação do disco após a adição do
reagente final.
• Os tempos de reação para a aplicação selecionada
estão dentro do intervalo de 3 a 10 minutos.
• O volume de reação encontra-se entre 75 μL e 185 μL.
Cálculo de ensaio de 2 pontos finais Para um ensaio de 2 pontos finais, com reagentes
dispensados no tempo de e , são usadas as
seguintes variáveis no gráfico e no cálculo:
1 mp
1
mp
2
34≤<≤
R1
R3
Hora
Absorvância
, , Valores do branco das cubetas da célula de
reação
(a)
(a) Veja Relatório de medição de branco das cubetas (11).
Pipetagem de amostra
,
Pipetagem do reagente no tempo de e
no tempo de
Ponto de medição 1, amostra em branco
(aqui antes da adição do reagente final)
Ponto de medição 2, ponto final (depois de a
reação ter atingido o equilíbrio)
, Valores de absorvância no ponto de
medição 1 e ponto de medição 2
C1
C2
C3
S
R1
R3
R1
R3
mp
1
mp
2
Amp
1
Amp
2
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15
Após a mistura da amostra e do reagente ter sido
medido como amostra em branco, ele é diluído mediante
a adição do reagente . Por isso, as leituras não podem
ser subtraídas, exceto se se tiver considerada uma
correção para a diluição. Um fator de diluição ( ) é
calculado como se segue e aplicado à absorvância da
amostra + R1:
z
2
O cálculo de resultados baseia-se no valor calculado de
absorvância do produto de reação final . Para
determinar a absorvância de reação , o valor de
amostra em branco é corrigida para diluição e, em
seguida, subtraída da absorvância de ponto final:
z
3
O cálculo da concentração do analito na amostra usa a
seguinte equação:
z
4
Fator de diluição
Volume de amostra
Volume R1
Volume R3
Valores de absorvância para cálculo da
concentração
Absorvância do ponto de medição 2
(a)
(a) Veja a lista do monitor de reações.
Absorvância do ponto de medição 1
(1)
Fator de diluição
Concentração do analito na amostra
Fator de calibração
(a)
(a) Veja a janela Info. de funcionamento.
Valor de absorvância calculado acima
Absorvância do calibrador 1 (Abs. S1)
(1)
Valor de concentração para calibrador 1
, Constantes do sistema para um declive de 1 e
uma interceptação de 0
R1
R3
d
d
V
samp
V
R1
+
V
samp
V
R1
V
R3
++
----------------------------------------------
=
d
V
samp
V
R1
V
R3
A
x
A
x
A
x
Amp
2
dAmp
1
⋅–=
A
x
Amp
2
Amp
1
d
C
x
KA
x
A
b
–()C
b
+[]IF
A
⋅ IF
B
+=
C
x
K
A
x
A
b
C
b
IF
A
IF
B
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16 Sobre a calibração
Sobre a calibração
O termo de calibração refere-se à determinação de uma
relação válida entre o valor de concentração medido e a
concentração real do analito. Para os ensaios de ponto
final, o valor medido é a absorvância. A representação
gráfica de tal relação de absorvância/concentração é a
curva de calibração, também chamada de curva de
trabalho.
Nesta secção
Sobre tipos de calibração (16)
Sobre o fator K (22)
Sobre os métodos de calibração (23)
Sobre a pesagem (24)
Aspectos gerais das verificações de calibração (25)
Sobre tipos de calibração
Os tipos de calibração descrevem o comportamento de
uma curva de calibração e da sua função matemática.
Nesta secção
Aspectos gerais dos tipos de calibração (17)
Sobre a calibração linear (18)
Sobre a calibração RCM4 (20)
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17
Aspectos gerais dos tipos de calibração
O sistema usa diferentes modelos matemáticos para
descrever a relação entre a absorvância medida e a
concentração do analito de interesse.
Revision: sh/EF, 2015-09-07: Deleted part about
setting up a test manually because this is not possible
on c513. Revision 27.08.2015
Normalmente, os tipos de curva de calibração são
desenvolvidos pela Roche Diagnostics. As definições dos
tipos de curva estão definidos nos campos Tipo, Ponto,
Span e Peso em Utilitário > Aplicação > Calib.
Calibrações lineares As calibrações lineares são usadas para testes cujos
valores de absorvância de diferentes concentrações
formam uma linha reta. Se uma calibração linear estiver
baseada em 2 medições de calibrador, ela é chamada de
calibração linear de 2 pontos.
Calibrações não lineares As calibrações não lineares são usadas para testes cujos
valores de absorvância de diferentes concentrações
formam um gráfico não linear, mas reproduzível. É
necessário um mínimo de 5 e um máximo de
6 calibradores para a calibração. O tipo de calibração
RCM4 é uma calibração não linear.
O tipo de calibração linear e o RCM4 podem ser usados
com ensaios de 1 ponto, bem como ensaios de 2 pontos
finais.
u Sobre os ensaios de 1 ponto (12)
Sobre os ensaios de 2 pontos finais (14)
Tipo de
calibração
Modelo matemático Entradas de campo no software
Linear Ponto: 2
Span: 2
RCM4 Ponto: 5–6
Span: 2-6
y Aspectos gerais dos tipos de calibração
yabx⋅+=
Conc. (x)
Abs. (y)
A
ad–
1
Ce–
b
------------
c
+
------------------------------
d+=
Conc. (x)
Abs. (y)
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18 Sobre a calibração
Sobre a calibração linear
Revision: sh/SA, 2015-09-07: Corrected that calibrator
1 is not zero but a dilution of calibrator 2. Revision
28.08.2015
Para a calibração linear de 2 pontos, a absorvância de
2 calibradores é medida, com o calibrador 1 sendo uma
diluição do calibrador 2. Esses 2 pontos são usados para
estabelecer um gráfico linear e seu declive é usado no
cálculo de resultados subsequentes de pacientes ou de
CQ.
w Gráfico de calibração linear de 2 pontos
Cálculo linear de 2 pontos O modelo matemático para uma calibração linear de 2
pontos é a equação para uma linha reta ,
onde é a interceptação y e é o declive. As variáveis
da equação são definidas como se seguem:
Absorvância
Concentração
Se
Concentração
Absorvância
Se
Valor de absorvância da amostra
Absorvância do calibrador 1 (Abs. S1)
Absorvância do calibrador 2
Valor de concentração para calibrador 1
Concentração do analito na amostra
Valor de concentração para calibrador 2
A
x
A
b
A
S2
C
b
C
x
C
S2
Concentração do analito
Absorvância
Absorvância quando a concentração do analito
é0
Proporção da alteração da absorvância para a
alteração da concentração
yabx⋅+=
a
b
xC=
yA=
a
b
Roche Diagnostics
Analisador cobas c 513 · Software Versão 02-03 · Princípios analíticos básicos · Versão 2.1
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Declive O declive de uma linha reta pode ser derivado tanto pela
fórmula (se forem usados 2 pontos)
como pelo método dos mínimos quadrados (se forem
usados pontos múltiplos). Para o primeiro caso, a
comparação com o gráfico de calibração linear de 2
pontos C
b
≠ 0 exibe e . A
fórmula para o declive pode ser solucionada para
. Essa equação mostra que
é igual ao fator K recíproco. Por isso, .
Interceptação Y Comparação com o gráfico de calibração linear de 2
pontos C
b
≠ 0 mostra a interceptação y
, onde é a absorvância e o valor
de concentração para o calibrador 1. Com o declive e a
interceptação y determinados, é possível para resolver a
equação para para calcular a
concentração de analito em uma amostra :
z
5
obtém , onde
Mediante a substituição de , , e , obtém-se a
seguinte equação:
z
6
Que é equivalente a
Duas constantes adicionais são aplicadas a essa fórmula
para corrigir o resultado para desvio sistemático que
deriva do sistema. O cálculo da concentração de amostra
é exibido na seguinte equação:
z
7
byΔ() xΔ()⁄=
yΔ A
S2
A
b
–=
xΔ C
S2
C
b
–=
bA
S2
A
b
–()C
S2
C
b
–()⁄=
b
b 1 K⁄=
Concentração do analito na amostra
Fator K
Valor de absorvância da amostra
Absorvância do calibrador 1 (Abs. S1)
Valor de concentração para calibrador 1
, Constantes do sistema representando um declive
de 1 e uma interceptação de 0
aA
b
bC
b
⋅()–=
A
b
C
b
yabx⋅+=
x
C
x
yabx⋅+=
x
1
b
---
ya–()=
aA
b
bC
b
⋅()–= b 1 K⁄= xC
x
= yA
x
=
a
b
x
y
C
x
KA
x
A
b
bC
b
⋅–()–[]=
C
x
KA
x
A
b
–()C
b
+[]=
C
x
KA
x
A
b
–()C
b
+[]IF
A
⋅ IF
B
+=
C
x
K
A
x
A
b
C
b
IF
A
IF
B
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20 Sobre a calibração
Sobre a calibração RCM4
A calibração RCM4 aplica-se a uma curva de calibração
em que a absorvância aumenta ou diminui de uma forma
não linear para aumentar em concentração.
Cálculo de RCM4 Para calcular a aproximação da curva de calibração
RCM4, use o modelo matemático seguinte:
z
8
Concentração
Absorvância
Valor de absorvância da amostra
Valor de absorvância do calibrador 1 (Abs.
S1)
, , … Valor de absorvância dos calibradores 2 a 6
Valor de absorvância do calibrador (N)
Valor de concentração para o analito na
amostra
Valor de concentração para calibrador 1
, , … Valor de concentração para calibradores 2
a6
Valor de concentração para calibrador (N)
A
x
A
b
A
S2
A
S3
A
N
C
x
C
b
C
S2
C
S3
C
N
Absorvância
Concentração do analito.
O parâmetro que representa a absorvância na
concentração C = e. Para o parâmetro e = 0, é
igual à concentração 0 ( ).
O parâmetro representa a concentração onde a
absorvância é ½ do span entre e .
Os parâmetros descrevem a curvatura da curva
de calibração.
Os parâmetros representam a absorvância
prevista para concentração infinita ( ).
Os parâmetros representam uma mudança ao
longo do eixo de concentração.
A
ad–
1
Ce–
b
------------
c
+
------------------------------
d+=
A
C
a
A
b
b
A
inf
A
b
c
d
A
inf
e
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